Articles

Generace tetramycin B derivát s lepší farmakologické vlastnosti založené na dráhy inženýrství

Polyenových antibiotik, včetně amfotericinu b, nystatin, pimaricin, a tetramycin, jsou důležité antimykotika. Zvýšení produkce polyenů a generace jejich lepší analogy na základě biosyntetickou dráhu inženýrství vzbudila široký zájem v žádosti výzkumy. Zde jsou tetramycin a nystatin, které sdílejí většinu prekurzorů acyl-CoA, produkovány Streptomyces hygrospinosus var. beijingensis CGMCC 4.1123. Intracelulární malonyl-CoA je tedy kvantitativní analýzou v tomto kmeni divokého typu nedostatečná pro rozšíření Tetramycinu PKSs (polyketidsyntázy). K obcházení tohoto problému a zvýšení titru tetramycinu byl narušen konkurenční biosyntetický genový klastr acyl-CoA (BGC) nystatinu a biosyntetické geny malonyl-CoA ze s. coelicolor M145 byly integrovány a nadměrně exprimovány v Nys-disruption mutant strain (SY02). Kromě toho, aby se specificky hromadí tetramycin B z A, dvě kopie tetrK a kopii tetrF byly zavedeny, což vede k povýšení tetramycin B fermentration titru o 122% na 865 ± 8 mg/L, než divoký typ. V tomto optimalizované kmen, nový tetramycin derivát, 12-deskarboxy-12-methyl tetramycin B, byl vytvořen s titrem 371 ± 26 mg/L prostřednictvím inaktivace o P450 monooxygenase gen tetrG. Ve srovnání s tetramycin B, nové sloučeniny vykazovaly vyšší antifungální aktivitu proti Saccharomyces cerevisiae a Rhodotorula glutinis, ale nižší hemolytickou toxicity erytrocytů. Tento výzkum poskytl dobrý příklad využití biosyntetických inženýrských strategií pro zlepšení titru fermentace polyenu a vývoj derivátů pro léčebné aplikace.