generarea derivatului tetramicinei B cu proprietăți farmacologice îmbunătățite bazate pe ingineria căii
antibioticele polienice, inclusiv amfotericina, Nistatina, pimaricina și tetramicina, sunt agenți antifungici importanți. Creșterea producției de poliene și generarea analogilor lor îmbunătățiți pe baza ingineriei căii biosintetice a stârnit o îngrijorare largă în cercetările de aplicare. Aici, tetramicina și Nistatina, ambele având în comun majoritatea precursorilor acil-CoA, sunt produse de Streptomyces hygrospinosus var. beijingensis CGMCC 4.1123. Astfel, malonil-CoA intracelular se dovedește a fi insuficient pentru extensia pkss (poliketide sintaze) a tetramicinei prin analiză cantitativă în această tulpină de tip sălbatic. Pentru a ocoli această problemă și a crește titrul de tetramicină, clusterul de gene biosintetice concurente acil-CoA (BGC) al nistatinei a fost perturbat, iar genele biosintetice ale malonil-CoA din S. coelicolor M145 au fost integrate și supraexprimate în tulpina mutantă NYS-disruption (SY02). Mai mult, pentru a acumula în mod specific tetramicina B din A, au fost introduse două copii ale tetrK și o copie a tetrF, rezultând creșterea titrului de fermentrare a tetramicinei B cu 122% până la 865 octocent 8 mg/L decât tipul sălbatic. În această tulpină optimizată, un nou derivat de tetramicină, 12-decarboxi-12-metil tetramicină B, a fost generat cu un titru de 371 de 26 mg/l, prin inactivarea unei gene monooxigenază P450 tetrG. Comparativ cu tetramicina B, noul compus a prezentat o activitate antifungică mai mare împotriva Saccharomyces cerevisiae și Rhodotorula glutinis, dar toxicitate hemolitică mai mică la eritrocite. Această cercetare a oferit un bun exemplu de utilizare a strategiilor de inginerie biosintetică pentru îmbunătățirea titrului de fermentare a polienei și dezvoltarea derivaților pentru aplicații medicinale.
Leave a Reply