Otto Frank a studiat medicina la Munchen și Kiel între 1884 și 1889 (licențiat în Munchen 1889). În perioada 1889-1891 a urmat cursuri de Matematică, Chimie, Fizică, anatomie și zoologie în Heidelberg, Glasgow, Munchen și Strasbourg. Apoi a lucrat până în 1894 ca asistent al lui Carl Friedrich Wilhelm Ludwig în Physiologisches Institut din Leipzig. Acolo, în 1892, și-a finalizat studiile de doctorat (doctorat).ulterior, din 1894, Frank a lucrat ca asistent la Institutul de fiziologie al lui Carl von Voit, unde a studiat funcția cardiacă folosind abordări derivate din analizele termodinamice anterioare ale contracției mușchilor scheletici. Lucrarea sa privind comportamentul mușchiului cardiac a fost subiectul lucrării sale post-doctorale. În 1902 a devenit profesor extraordinar și din 1905 până în 1908 a întreprins lucrări suplimentare pe această temă înainte de a deveni profesor titular (Ordinariat). Apoi s-a întors la M Inktivnchen pentru a continua această lucrare. Carl J. Wiggers a vizitat Laboratorul lui Frank în 1912 și l-a găsit pe Frank un „analist strălucit, un sistematist priceput, un matematician talentat și un gânditor creativ…”, dar secret și dificil de lucrat. Wiggers s-a întors în SUA în toamna anului 1912 după ce a ‘contrabandă’ copii ale unora dintre echipamentele lui Frank cu el, în ciuda acestui fapt Wiggers și Frank par să fi menținut relații cordiale ulterior. Frank pare să fi fost un profesor exigent și Richard Bing, un Editor al Journal of Molecular and Cellular Cardiology, care a studiat cu Frank, l-a amintit ca ‘…o teroare sfântă, urând mediocritatea și mulți studenți au mușcat praful în examenul de Fiziologie. Frank a continuat să lucreze în m-Xqxnchen până la pensionarea forțată în 1934 din cauza opoziției sale față de regimul nazist.