Costituenti cellulari
I costituenti cellulari che possono essere presenti nelle urine includono leucociti, eritrociti, cellule epiteliali e spermatozoi. Si prega di fare riferimento anche alla tabella di compilazione delle cellule che possono essere viste nelle urine e nell’atlante delle analisi delle urine. La valutazione dei costituenti cellulari richiede in qualche modo la concentrazione di urina, più comunemente eseguita mediante centrifugazione, ma la sedimentazione gravitazionale dell’urina all’interno di una piastra microtitolare può anche essere eseguita (e visualizzata da un microscopio invertito, che è probabilmente disponibile solo in laboratori selezionati) (Chase et al 2017). Il volume di urina centrifugata influenzerà probabilmente anche il numero di costituenti cellulari nello striscio. Può essere difficile standardizzare questo volume, quando i laboratori veterinari ricevono spesso una serie di volumi da esaminare (<da 0,5 a >100 mL). Nel nostro laboratorio, standardizziamo il volume di urina a 5 ml quando possibile.
Globuli bianchi
I globuli bianchi (WBC) sono riportati semi-quantitativamente come il numero visto per high power field (HPF) utilizzando l’obiettivo high dry (40x):
Interpretazione
a Meno di 5 WBC/HPF è comunemente accettato come normale (tuttavia, non è chiaro dove questo numero è stato derivato da una pulizia di urina (ad es. il minimo ematuria, cystocentesis collezione, <5 WBC/HPF potrebbe benissimo essere anormale). Un numero maggiore (piuria) indica generalmente la presenza di un processo infiammatorio da qualche parte lungo il corso del tratto urinario (o del tratto urogenitale in campioni vuoti). Piuria è spesso causata da infezione del tratto urinario, e molte volte i batteri possono essere visti su sedimenti prep. A seconda dei segni clinici, la piuria può essere un’indicazione per la coltura di urina anche se non si osservano batteri. Anche le cause non settiche di infiammazione, come uroliti e tumori, devono essere considerate.
Identificazione
Nei sedimenti urinari regolari non colorati, i WBC sono piccole cellule, di solito 1,5 – 2 volte più grandi di un RBC (vedi immagine sotto), sono regolarmente rotondi, incolori e hanno un aspetto leggermente granuloso. Come gli eritrociti, WBC può lyse in urina molto diluita o altamente alcalina. Il tipo di WBC (neutrofili, linfociti, monociti ecc.) non può essere determinato da una normale preparazione umida di urina, ma di solito sono neutrofili. Un esame citologico sarebbe richiesto per determinare quali tipi WBC sono presenti nelle urine, tuttavia questo è raramente indicato per questo scopo.
Il WBC deve essere distinto dai globuli rossi e dalle piccole cellule epiteliali.
LEUCOCITI e cellule epiteliali
Bianco e rosso cellule del sangue
- WBC vs RBC
Il granulosa dei GLOBULI bianchi, aiuta a distinguere WBC da RBC che sono più uniformi. I WBC sono anche incolori mentre gli RBC sono leggermente tinti di rosso dall’emoglobina. L’identificazione della forma nucleare segmentata di un neutrofilo è utile, ma questa caratteristica è spesso inapparente, specialmente se il campione non è fresco (il nucleo si gonfia e si arrotola con lo stoccaggio).
- WBC vs piccole cellule epiteliali
Questa distinzione è molto più difficile e può fare affidamento sull’esame citologico del sedimento urinario. I WBC sono generalmente più piccoli delle cellule epiteliali e sono più rotondi (si noti che i WBC possono gonfiarsi con lo stoccaggio e apparire più grandi del normale). Le cellule epiteliali hanno bordi più angolari o forme poligonali e nuclei da rotondi a ovali.
Globuli rossi
I globuli rossi (RBC) sono riportati semi-quantitativamente come numero visto per campo ad alta potenza (HPF):
nessuno visto; <5, 5-20, 20-100, o >100/HPF.
L’aspetto di RBC nell’urina fresca e immagazzinata.
Interpretazione
Fino a 5 RBC / HPF sono generalmente considerati accettabili per l’urina “normale”.
L’aumento dei globuli rossi nelle urine è definito ematuria, che può essere dovuta a emorragia, infiammazione, necrosi, trauma o neoplasia da qualche parte lungo il tratto urinario (o tratto urogenitale in campioni vuoti).
Il metodo di raccolta deve essere considerato quando si interpreta l’ematuria per aiutare nella localizzazione, e anche perché il cateterismo, la cistocentesi e la compressione manuale possono causare emorragia iatrogena.
Identificazione
L’aspetto dei globuli rossi nelle urine dipende in gran parte dalla concentrazione del campione e dal periodo di tempo in cui i globuli rossi sono stati esposti.
Nelle urine fresche, i globuli rossi sono cellule rotonde e lisce e sono leggermente tinti di rosso (dall’emoglobina). Nei campioni freschi con peso specifico di 1.010-1.020, RBC può mantenere la loro forma normale del disco, in particolare nei cani. Nelle urine più concentrate (>1.025), i globuli rossi perdono la loro consistenza liscia, tendono a ridursi e appaiono come piccole cellule crenate (vedi immagine a destra). In campioni più diluiti, tendono a gonfiarsi. A peso specifico dell’urina<1.008 e/o pH altamente alcalino, è probabile la lisi degli eritrociti. I globuli rossi lisati appaiono come “fantasmi” molto deboli o possono essere praticamente invisibili.
Cellule epiteliali
Diversi tipi di cellule epiteliali possono essere osservati nelle urine. Alcuni di questi sono facilmente identificabili, tuttavia è difficile distinguere le piccole cellule epiteliali transitorie dai globuli bianchi e le cellule epiteliali tubulari renali dalle cellule epiteliali transitorie. Pertanto, tutte le cellule non squamose nelle urine sono considerate di origine transitoria. Quando non siamo sicuri dell’origine delle cellule nelle urine, possiamo macchiare un sedimento urinario con la macchia di Wright (o Diff-Quick) ed eseguire un esame citologico sul sedimento urinario.
Le cellule epiteliali sono soggettivamente semi-quantificate nelle urine (di solito a bassa potenza utilizzando l’obiettivo 10x) come: nessuna vista, poche, moderate, molte
Cellule neoplastiche di origine renale, urinaria o riproduttiva possono esfoliare nelle urine e un’analisi delle urine è sicuramente indicata se si sospetta un tumore in uno di questi siti nell’animale. L’esame di una preparazione regolare di sedimento urinario può essere il primo indizio per l’identificazione delle cellule neoplastiche, tuttavia la diagnosi di neoplasia si basa su criteri citologici di malignità nelle cellule, che non sono facili da discernere in queste preparazioni umide. Pertanto, si consiglia di eseguire un’analisi citologica dell’urina (utilizzando una macchia ematologica standard, come la macchia di Wright) se si sospetta una neoplasia.
Cellule epiteliali di transizione
Cellule epiteliali di transizione
Il tratto urinario dalla pelvi lungo gli ureteri fino alla vescica e all’uretra prossimale è rivestito da cellule epiteliali di transizione. Queste cellule variano in dimensioni e forma a seconda della posizione da cui provengono, ad es. quelli della pelvi renale sono più caudati mentre quelli della vescica sono più rotondi a poligonali e di dimensioni variabili. Queste cellule naturalmente slough nelle urine in numero piuttosto basso, in modo da nessuna a poche cellule epiteliali di transizione sono visti nelle urine da animali sani. Si noti che questo dipende dal metodo di raccolta delle urine, poiché queste cellule saranno squarciate (traumaticamente) quando la vescica viene cateterizzata.
Le cellule epiteliali transitorie devono essere distinte dal WBC, perché entrambe hanno lo stesso aspetto granulare. In generale, le cellule epiteliali di transizione sono più grandi e hanno bordi più irregolari rispetto ai WBC (che sono uniformemente più rotondi; vedi immagine a destra). Tuttavia, può essere difficile differenziare le piccole cellule epiteliali da WBC in un monte bagnato di urina. In caso di dubbio, eseguire uno striscio citologico del sedimento urinario.
Cheratinizzato e non cheratinizzato cellule squamose in un campione di urina
cellule epiteliali Squamose
Questi possono essere cheratinizzato o non cheratinizzato.
Le cellule epiteliali squamose non cheratinizzate provengono dall’uretra distale, dal prepuzio e / o dalla vagina. Sono più grandi delle cellule di transizione e hanno piccoli nuclei centrali. Possono essere rotondi o avere uno o più bordi piatti. Le cellule epiteliali squamose cheratinizzate provengono dalla pelle o dalla vulva e sono grandi cellule con bordi angolari. Possono avere o meno nuclei (vedi immagine a destra). I nuclei sono più visibili nelle cellule quando l’urina è macchiata con la Sede-macchia (vedi il pannello inferiore della seconda immagine a destra). In caso di dubbio sull’origine delle cellule, una macchia di Wright (macchia ematologica di routine) può essere eseguita su un sedimento urinario e dimostra i nuclei centrali e i bordi angolari delle cellule epiteliali squamose.
Le cellule squamose sono spesso viste come contaminanti nei campioni di urina svuotati e possono anche contaminare i campioni raccolti mediante cateterizzazione. L’urina raccolta dalla cistocentesi non deve contenere cellule epiteliali squamose.
Cellule squamose macchiate
Si noti che sebbene queste cellule siano considerate contaminanti, un numero elevato può rappresentare condizioni genitourinarie anormali, in particolare metaplasia squamosa della prostata nel cane. Ciò si verifica secondario all’eccesso di estrogeni, di solito secreto dai tumori testicolari (in particolare i tumori a cellule di Sertoli, ma questo è stato riportato anche con tumori a cellule interstiziali).
Cellule epiteliali tubulari renali
Le cellule epiteliali tubulari renali sono raramente osservate nelle urine e, come menzionato sopra, sono molto difficili da distinguere dalle cellule epiteliali transitorie. Se nelle urine si osservano un gran numero di cellule epiteliali più piccole di aspetto uniforme (dimensioni e forma), si sospetta un’origine renale per queste cellule. Le cellule epiteliali transitorie tendono ad essere più variabili in dimensioni e forma (in una certa misura). La desquamazione di un gran numero di cellule epiteliali tubulari renali indicherebbe una lesione tubulare renale.
Neoplasia
Cellule epiteliali neoplastiche non colorate e colorate nelle urine
Le cellule neoplastiche, tipicamente quelle di origine epiteliale transitoria (carcinoma a cellule transitorie o TCC) possono fluire nelle urine. La presenza di queste cellule può essere diagnostica di neoplasia urinaria, tuttavia non sono sempre visibili nelle urine negli animali colpiti. Pertanto, la mancanza di queste cellule in un’analisi delle urine non esclude la neoplasia.
I TCC sono più comuni nei cani e spesso hanno origine nel trigone della vescica urinaria. L’uretra dei cani maschi e femmine (uretra prostatica per i maschi) è anche un sito comune, con TCC uretrale prostatico che spesso invade la prostata, imitando i carcinomi prostatici primari. La diagnosi di neoplasia dipende dall’identificazione dei criteri citologici di malignità nelle cellule epiteliali, ad es. marcata variazione della dimensione nucleare e cellulare (anisocariosi e anisocitosi, rispettivamente), nucleoli multipli di dimensioni variabili all’interno di un nucleo, multi-nucleazione con anisocariosi intracellulare, macronucleoli. Queste caratteristiche sono riconoscibili solo in modo affidabile negli strisci citologici (macchiati con una macchia ematologica come Diff-Quick o la macchia di Wright) e sono difficili da identificare con sicurezza in una preparazione non colorata di urina (vedi immagine sopra a destra). Pertanto, una citologia delle urine dovrebbe essere eseguita su animali con tumori sospetti.
linfoma Renale (Wright macchia)
linfoma Renale (non colorati)
TCC di solito invadono la parete della vescica e causare emorragia. Possono anche diventare secondariamente infiammati da necrosi o un’infezione batterica sovrapposta. Pertanto, l’ematuria e, in misura minore, la piuria, possono essere caratteristiche di un’analisi delle urine negli animali con TCC.
Raramente, altri tumori originari della vescica o del rene (ad es. linfoma, carcinoma renale) può esfoliare nelle urine. Nella foto a destra sono le immagini di un sedimento urinario non colorato e macchiato di Wright da un gatto con linfoma renale. I linfoblasti neoplastici erano esfoliati nelle urine e fornivano la diagnosi in questo caso.
Sperma
Sperma
Gli spermatozoi nelle urine sono generalmente significativi solo come testimonianza della mascolinità intatta del donatore. Essi possono essere visti nelle urine da maschi raccolti da svuotamento, cateterizzazione, o cistocentesi. Raramente, possono essere osservati nell’urina svuotata da una femmina di recente allevamento. La presenza di sperma è riportata come parte dell’esame completo del sedimento, il cui obiettivo è quello di riportare tutti i risultati microscopici.
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