Otto Frank estudou medicina em Munique e Kiel, entre 1884 e 1889 (licenciado em Munique, 1889). Entre 1889 e 1891 estudou matemática, química, física, anatomia e zoologia em Heidelberg, Glasgow, Munique e Estrasburgo. Trabalhou até 1894 como assistente de Carl Friedrich Wilhelm Ludwig no “Physiologisches Institut” em Leipzig. Lá, em 1892, completou seus estudos de doutorado (doutorado).posteriormente, a partir de 1894 Frank trabalhou como assistente no Instituto fisiológico de Carl von Voit em Munique, onde estudou função cardíaca usando abordagens derivadas de análises termodinâmicas anteriores da contração do músculo esquelético. Seu trabalho sobre o comportamento do músculo cardíaco foi o tema de seu trabalho pós-doutorado. Em 1902 tornou-se professor extraordinário e de 1905 a 1908 empreendeu mais trabalhos sobre este tema antes de se tornar professor (Ordinariat). Em seguida, ele voltou a Munique para continuar este trabalho. Carl J. Wiggers visitou o laboratório de Frank em 1912 e encontrou Frank um “analista brilhante, um sistematista hábil, um matemático talentoso, e um pensador criativo…”, mas reservado e difícil de trabalhar. Wiggers retornou aos estados unidos no outono de 1912, tendo ‘contrabandeado’ cópias de alguns dos equipamentos de Frank para fora com ele, apesar destes Wiggers e Frank parecem ter mantido relações cordiais posteriormente. Frank parece ter sido um professor exigente e Richard Bing, um Editor do Journal of Molecular and Cellular Cardiology, que estudou com Frank, lembrou-o como ‘…um terror Sagrado, odiando a mediocridade, e muitos estudantes morderam a poeira no exame em Fisiologia”. Frank continuou a trabalhar em Munique até sua aposentadoria forçada em 1934 devido a sua oposição ao regime Nazista.